原标题:LB培养基的配制方法
导读:
培养基培养基的配制方法 LB 液态培养基的配制 根据《分子克隆实验指南》,LB 液态培养基的配制中,配制每升培养基,应该 在950 ml 去离子水中加入: 胰化蛋白胨 10...
培养基培养基的配制方法 LB 液态培养基的配制 根据《分子克隆实验指南》,LB 液态培养基的配制中,配制每升培养基,应该 在950 ml 去离子水中加入: 胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解,用5mol/LNaOH 调pH 至7.0。另用去离子水定容至 1L。在15psi 高压下蒸汽灭菌20min。 LB 培养基是培养基中的一种,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种, 使菌种成倍扩增,达到使用要求。培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单 独存活和扩增的工程菌。通过培养工程菌,可以表达大量的外源蛋白,也可以拿 到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。 LB 固态培养基的配制 LB 固体培养基1L 和液体一样,加15g 琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗 生素,并且倒好板。 LB 固体培养基倒板 1.配制:100mlLB 培养基加入1.5g 琼脂粉。 2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB 固体培养基置与55的水浴中, 待培养基温度降到55时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效, 并充分摇匀。 3.倒板:一般10ml 个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15 分钟。 4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4保存,一个月内使用。 在分子生物学试验中LB 培养基常常用于培养细菌。如菌种的扩繁、转化体的 筛选等。培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。 培养基液体培养基与固体培养基的基本物质相同,只是在液体培养基之上再加入一定 量的琼脂。
LB培养基是培养基中的一种,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。
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